RT-PCR法分离伊氏锥虫VSG基因的研究
1998-12-30分类号:S852.7
【部门】中国农科院上海家畜寄生虫病研究所 中国农科院上海家畜寄生虫病研究所 200232 200232
【摘要】应用异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法分离伊氏锥虫安徽株克隆虫体 ShTatl 的二个抗原变异体ShTatl.3和 ShTatl.5总 RNA,在含有甲醛的琼脂凝胶电泳后,转印到硝酯纤维膜上.根据布氏锥虫 VS-Gm RNA3′端保守序列,设计合成了一个互补于它的含18个碱基的寡恢苷酸5′-GGTGTTAAAATA-TATCAG-3′.经~(32)P 标记、Northern 杂交,首次证明伊氏锥虫含有同样的保守序列.利用合成的18碱基寡核苷酸作为反转录特异引物,成功合成 cDNA 第一链,以 cDNA 第一链作为 PCR 扩增模板,均能特异性的扩增出一条主带为1.5kb 的 DNA,与 VSG 基因大...
【关键词】伊氏锥虫 VSG基因 分离
【基金】
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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