PCR技术诊断隐孢子虫病方法的建立及其初步应用
1998-12-30分类号:S855.9
【部门】解放军农牧大学寄生虫病教研室 解放军农牧大学寄生虫病教研室 解放军农牧大学寄生虫病教研室 解放军农牧大学寄生虫病教研室 解放军农牧大学寄生虫病教研室 长春 130062 长春 130062 长春 130062 长春 130062 长春 130062
【摘要】本研究应用聚合酶链反应(PCR)建立了一种检测人及牛粪便中隐孢子虫卵囊 DNA 的方法.以蔗糖梯度离心法纯化鼠源 C.muris 卵囊;甘油漂浮-G_3耐酸漏斗过滤法纯化牛源 C.muris、牛源 C.parvum 和鼠源C.parvum 卵囊.结果发现甘油漂浮-G_3耐酸漏斗过滤法纯化隐孢子虫卵囊具有纯度高、回收率达96%、介质便宜及操作简便等优点.纯化卵囊经液氮冻融后按常规法提取 DNA 作为 PCR 模板.根据 GenBank 中C.muris 和 C.parvum 18SrRNA 基因序列,应用计算机辅助设计合成一对 PCR 引物(上游引物:5′-AAACCCAACTTTGCG...
【关键词】隐孢子虫卵囊 隐孢子虫病 PCR技术 蔗糖梯度离心 过滤法 技术诊断 计算机辅助设计 液氮冻融 聚合酶链反应 引物扩增
【基金】
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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