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病毒性出血性败血症病毒单链抗体的原核表达及其功能鉴定

2016-01-15分类号:S941.413

【作者】王宏华  侯竹美  张全启  于海洋  王志刚  齐洁  王旭波  
【部门】中国海洋大学海洋生命学院  青岛农业大学海洋科学与工程学院  
【摘要】为制备病毒性出血性败血症病毒(VHSV)单链抗体(Single cHain Variable fragment antibody,ScfV)并鉴定其生物学功能,本研究提取抗VHSV单抗1g5的杂交瘤细胞株总rna并反转录获得cdna模板,通过Pcr扩增VHSV抗体的轻链可变区(Vl)和重链可变区(VH)编码序列,将其拼接成单链抗体Sc fV基因后插入载体Pet28a中,构建原核表达重组质粒并在大肠杆菌中诱导表达。结果表明,单链抗体主要以可溶性形式表达,分子量约28 ku,能特异性识别VHSV病毒的g蛋白并对VHSV病毒具有体外中和活性,其对VHSV病毒的g蛋白亲和力(kd)达到1.4×10~(...
【关键词】鱼  病毒性出血性败血症病毒  单链抗体
【基金】国家“八六三”高技术研究发展计划(2011AA10A402)~~
【所属期刊栏目】水产学报
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