重组虹鳟IFN-γ2的原核表达及抗IHNV活性分析
2016-10-15分类号：S917.4
【部门】中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室
【摘要】为获得虹鳟ＩＦＮ－γ２（ｒｔ ＩＦＮ－γ２）抗传染性造血器官坏死病毒（ＩＨＮＶ）活性的相关数据，实验根据ＮＣＢＩ已发表序列设计引物，提取经植物血凝素刺激后的虹鳟头肾细胞总ｒＮＡ，采用ｒｔ－ＰＣｒ方法扩增４７１ ＢＰ的该基因完整开放阅读框。将该基因重组至原核表达载体Ｐ Ｅｔ３２Ａ中，并转化大肠杆菌ｒｏｓＥｔｔＡ，进行诱导表达，ｓＤｓ－ＰＡＧＥ结果显示，目的蛋白以包涵体形式表达，大小约为３８．４ ｋｕ。重组蛋白经复性、纯化后在ＣＨｓＥ－２１４细胞上进行抗ＩＨＮＶ活性分析，结果显示，ｒｔ ＩＦＮ－γ２在ＣＨｓＥ－２１４细胞上抗ＩＨＮＶ活性为６．６３×１０６ｕ／ｍＧ。ｒＥＡｌ－ｔＩｍＥ ＰＣｒ结果显示．．．
【关键词】虹鳟IFN-γ2 原核表达 抗IHNV活性 抗病毒状态 保护率
【基金】国家科技支撑计划(2012BAD25B02); 黑龙江省应用技术研究项目与开发计划(GA13B401); 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(HSY201411)~~
【所属期刊栏目】水产学报
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