红鳍东方鲀去乙酰化酶SIRT3基因的克隆及原核表达
2016-08-25分类号:S917.4
【部门】新乡医学院基础医学院
【摘要】从红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)肝脏组织中提取总rNa,通过rT–pCr扩增,获得sirT3基因的编码阅读框(Orf),用原核表达载体p eT32a(+)构建p eT32a/sirT3重组质粒,用异丙基–β–D–硫代半乳糖苷(ipTg)将重组质粒p eT32a/sTrT3在大肠杆菌rOseTTa(De3)进行诱导表达,并用镍柱纯化融合表达蛋白。结果显示,红鳍东方鲀sirT3基因(Tr sirT3)Orf区大小为1 263 bp大小,编码420个氨基酸。经ipTg诱导表达后,获得1个带组氨酸(His)标签的融合蛋白,目的蛋白主要存在于上清溶液中,为可溶性表达。用镍离子亲和层析柱...
【关键词】红鳍东方鲀 去乙酰化酶 SIRT3基因 基因克隆 原核表达
【基金】河南省教育厅重点项目(14A310027); 新乡医学院高学历人才启动基金(505001)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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