鱼类传染性造血器官坏死病毒糖蛋白的酵母表面展示
2016-07-15分类号：S941.41
【部门】中国水产科学研究院黑龙江水产研究所
【摘要】糖蛋白（ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ，ｇ）是鱼类传染性造血器官坏死病毒的主要表面抗原，是病毒检测及疫苗研制的主要靶基因。为了对其进行酵母表面展示，本研究利用本实验室保存的含有ｉＨｎＶ－Ｓｎ１２０３毒株ｇ基因的质粒为模板，ｐｃｒ扩增富含抗原表位的糖蛋白基因片段后，连接酵母表面展示载体ｐ ｙＤ１，构建重组质粒ｐ ｙＤ１－ｇ。将ｐ ｙＤ１－ｇ转化酿酒酵母ｅＢｙ１００细胞后，利用半乳糖诱导ｇ蛋白的表达。利用细胞免疫荧光、ＷｅＳｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ及流式细胞仪检测酵母表面ｇ蛋白的表达情况。细胞免疫荧光结果显示，转化了ｐ ｙＤ１－ｇ重组质粒的酵母细胞表面呈现出特异性荧光；ＷｅＳｔｅｒｎ Ｂｌｏｔｔｉｎｇ．．．
【关键词】传染性造血器官坏死病病毒 糖蛋白 真核表达 酵母表面展示
【基金】中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(HSY201410); 黑龙江省自然科学基金(C201462); 黑龙江省应用技术研究与开发计划(GA13B401)~~
【所属期刊栏目】水产学报
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