红鳍东方鲀Foxo1基因的原核表达及纯化
2016-02-25分类号:S917.4
【部门】新乡医学院基础医学院 新乡医学院法医系
【摘要】采集红鳍东方鲀脂肪组织提取其总RNA,采用RT–PCR方法扩增和克隆红鳍东方鲀Foxo1基因的oRF,并构建其原核表达载体P ET–32/Foxo1,在大肠杆菌RosETTA(DE3)进行表达,通过IPTG诱导表达,对重组Foxo1蛋白进行可溶性分析、纯化及鉴定,结果表明:重组质粒P ET32A/Foxo1被成功构建;用IPTG进行诱导表达,融合蛋白主要以可溶蛋白形式存在,能与抗HIs标签的兔多克隆抗体发生特异性反应;纯化出了融合表达蛋白,获得了相对分子质量约为110 000的重组蛋白。
【关键词】红鳍东方鲀 FoxO1基因 原核表达 蛋白纯化
【基金】河南省科学技术厅科技攻关计划项目(122102310196); 河南省教育厅自然科学研究计划项目(12A150019)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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