同步检测7种鱼类病毒的扩增子拯救多重PCR(ARm-PCR)方法的建立和应用
2016-08-04分类号：S941.4
【部门】农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所 上海海洋大学水产与生命学院 青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室
【摘要】淋巴囊肿病毒（ＬＣＤＶ）、肿大细胞病毒属虹彩病毒（Ｍｅｇａ）、赤点石斑鱼神经坏死病毒（ＲｇＮＮＶ）、传染性造血器官坏死病毒（ＩＨＮＶ）、传染性胰脏坏死病毒（ＩＰＮＶ）、病毒性出血败血症病毒（ＶＨＳＶ）和传染性鲑鱼贫血症病毒（ＩＳａＶ）是养殖鱼类主要的病毒性病原，危害巨大。为实现这７种病原的高通量、同步检测，本研究在分析这７种病毒基因序列的基础上，设计了９组扩增子拯救多重ＰＣＲ（ａＲＭ－ＰＣＲ）引物，并对扩增体系中的Ｔａｑ酶、Ｍ～ｇ（２＋）、Ｄ ＮＴＰ、ＰＲＩＭｅＲ ＭＩｘ浓度及退火温度等参数进行调整和优化，结合基因芯片检测技术，建立了同步检测７种鱼类病毒的ａＲＭ－ＰＣＲ方法。优化后的ａＲＭ－Ｐ．．．
【关键词】鱼类病毒 多重检测 高通量 多重PCR
【基金】国家科技支撑计划课题(2012BAD17B01)资助
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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