溶藻弧菌外膜蛋白OmpU的克隆、表达条件优化及多克隆抗体制备
2016-03-16分类号:S941.4
【部门】陕西理工学院中德天然产物研究与开发利用联合研究所
【摘要】Omp U蛋白为溶藻弧菌主要外膜蛋白,具有很好的免疫原性,在疫苗上有很好的应用前景。本试验通过分子克隆获得Omp U蛋白的表达菌株,利用切胶纯化获得Omp U蛋白,免疫小鼠制备多克隆抗体,采用ELISA法检测抗体滴度为1∶3200倍,WEStErnBLOttIng法检测抗血清特异性较好。通过正交试验,获得Omp U菌株的最佳表达条件为:诱导时菌液OD600值1,加Iptg终浓度0.1mmOL/L,诱导时间8 h,温度32℃;最佳培养条件为:葡萄糖浓度0.4%,转速230 r/mIn,装液量50 m L。为Omp U工业发酵、蛋白功能与疫苗开发研究奠定基础。
【关键词】溶藻弧菌 OmpU蛋白 多克隆抗体 正交试验
【基金】陕西省教育厅科学研究计划项目(2013JK0723); 陕西理工学院人才启动项目(SLGQD13-15)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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