传染性造血器官坏死病毒微型基因组表达干扰素对病毒的抑制效应
2016-01-15分类号：S941
【部门】东北农业大学动物医学学院 东北农业大学动物科学与技术学院
【摘要】为构建传染性造血器官坏死病毒（ＩＨＮＶ ＨＬＪ－０９）微型基因组并表达虹鳟ＩＦＮ，采用ＲＴ－ＰＣＲ扩增ＩＨＮＶ ＨＬＪ－０９株的Ｎ、Ｐ、Ｌ、Ｇ和ＮＶ蛋白基因并亚克隆入真核表达载体ＰＣＩ中，构建辅助质粒ＰＣＩ－Ｎ、ＰＣＩ－Ｐ、ＰＣＩ－Ｌ、ＰＣＩ－Ｇ和ＰＣＩ－ＮＶ；将扩增获得的ＩＨＮＶ基因组两末端序列、增强型绿色荧光蛋白（ＥＧＦＰ）报告基因、虹鳟Ｉ型干扰素（ＩＦＮ）基因克隆到真核表达载体ＰＣＩ中构建出表达ＥＧＦＰ的ＩＨＮＶ微型基因组ＰＣＩ－ＬＦＧＴ和表达ＩＦＮ的ＩＨＮＶ微型基因组ＰＣＩ－ＬＦＩＴ；将ＰＣＩ－ＬＦＩＴ质粒转染已接种ＩＨＮＶ ＨＬＪ－０９毒株的ＥＰＣ细胞，实时荧光定量ＰＣＲ法测定细胞中．．．
【关键词】传染性造血器官坏死病毒 辅助质粒 虹鳟Ⅰ型干扰素 微型基因组
【基金】国家自然科学基金(31372568); 东北农业大学博士启动基金项目(2012RCB66)
【所属期刊栏目】淡水渔业
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