哲罗鲑胰岛素样生长因子-I的原核表达及活性鉴定
2016-11-15分类号:S917.4
【部门】中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 上海海洋大学水产与生命学院
【摘要】为进一步了解哲罗鲑IGF-I,实验采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从哲罗鲑肝脏的总RNA中扩增出胰岛素样生长因子-I(IGF-I)的C DNA开放阅读框(oPeN ReADING FRAme,oRF)序列。利用原核表达载体P S构建重组表达质粒(IGF-I/P S),并将其转化到宿主大肠杆菌RoSeTTA后经IPTG诱导获得重组哲罗鲑IGF-I蛋白。经SDS-PAGe电泳检测,在35~50 ku有条带与预期相符,且重组蛋白以包涵体的形式存在。包涵体经变性/复性实验后,获得纯化的IGF-I融合蛋白。eLISA鉴定结果显示,目的蛋白能特异性识别抗鱼类IGF-I抗体,表明获得了具有免疫...
【关键词】哲罗鲑 胰岛素样生长因子-I 原核表达 生物活性
【基金】国家科技支撑计划(2012BAD25B10); 公益性行业(农业)科研专项(201003055-14)~~
【所属期刊栏目】水产学报
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