对虾白斑综合征病毒囊膜蛋白VP28和VP26的毕赤酵母组成型分泌表达
2016-08-04分类号:S945.4
【部门】水产动物营养与饲料农业部重点实验室海水养殖教育部重点实验室中国海洋大学水产学院
【摘要】近年来,重组VP28和VP26蛋白作为蛋白亚单位疫苗,在增强对虾抗白斑综合征病毒(WSSV)感染的过程中具有重要作用。本研究根据Gen Bank中WSSV的基因序列设计引物,以WSSV粗提液为模板进行普通PCR扩增,得到VP28和VP26基因,再用引物悬挂法将eCo RⅠ和XBaⅠ酶切位点分别添加到VP28和VP26基因的5端和3端。目的基因经双酶切后插入到表达载体P GaPZαa,转化ToP10大肠杆菌,经博莱霉素(ZeoCin)抗性筛选阳性重组酵母表达载体。aVRⅡ酶切线性化之后,电击转化X-33毕赤酵母感受态细胞,经ZeoCin抗性筛选得到阳性重组酵母。SDS-PaGe电泳分析重组酵母表...
【关键词】白斑综合征病毒 VP28 VP26 重组表达 毕赤酵母
【基金】国家公益性行业(农业)专项经费项目(201103034)资助
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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