转β-甘露聚糖酶基因克隆猪的制备与分析
2016-04-20分类号:S828
【部门】龙岩学院生命科学学院龙岩学院动物营养科研创新团队 华南农业大学动物科学学院/国家生猪种业工程技术研究中心
【摘要】【目的】将前期构建的含有黑曲霉β-甘露聚糖酶基因mana的质粒p pSpBGp-mana转染杜洛克猪胎儿成纤维细胞,利用G418筛选出转基因细胞系,通过体细胞核移植方法生产出转mana基因猪,利用分子生物学方法对转基因猪进行阳性鉴定、基因及蛋白表达水平的检测,同时测定转基因猪唾液β-甘露聚糖酶酶活、粪便营养物质含量,旨在为生产及进一步研究转mana基因猪提供一些科学依据。【方法】用限制性内切酶not I将质粒p pSpBGp-mana线性化并通过脂质体法将其转入杜洛克猪胎儿成纤维细胞,然后用不同浓度的G418进行筛选、维持培养,将筛选后的细胞进行体细胞核移植生产克隆猪;克隆猪出生后采取尾组织样...
【关键词】β-甘露聚糖酶 转基因克隆猪 制备 检测分析
【基金】国家转基因生物新品种培育重大专项(2014ZX08006004); 广东省科技计划项目(2011A020102003); 龙岩学院青年教师攀登项目(LQ2014008)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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