IHHNV编码蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活研究
2016-09-05分类号：S945.1
【部门】广西壮族自治区水产科学研究院广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室 广西大学动物科学技术学院 宁波市海洋与渔业研究院
【摘要】应用酵母双杂交体系，构建凡纳滨对虾ＩＨＨＮＶ ３个开放阅读框的酵母双杂交诱饵载体，并对该载体的表达产物对酵母细胞的毒性及其对报告基因的自激活作用进行检测，为运用酵母双杂交文库筛选与病毒互相作用的蛋白提供参考。对凡纳滨对虾ＩＨＨＮＶ病毒３个开放阅读框的基因片段进行ＰＣＲ特异性扩增，并运用ＩＮ－ＦｕｓＩｏＮ技术将该基因片段与双酶切的酵母双杂交诱饵质粒ＰＧＢＫＴ７进行连接，获得重组质粒ＰＧＢＫＴ７－ＣＰ、ＰＧＢＫＴ７－Ｎｓ１和ＰＧＢＫＴ７－Ｎｓ２，并进行自激活和毒性检测。结果表明，ＰＧＢＫＴ７－ＣＰ、ＰＧＢＫＴ７－Ｎｓ１和ＰＧＢＫＴ７－Ｎｓ２等３个重组质粒对ＭＥＬ１报告基因无自激活性；对ＡｕＲ１－Ｃ．．．
【关键词】凡纳滨对虾 IHHNV 自激活作用 酵母双杂交
【基金】广西自然科学基金项目(2014jjAA30236); 自治区直属公益性科研院所基本科研业务费(GXIF-2014-001;GXIF-2014-003); 现代农业产业技术体系建设专项项目(CARS-47); 国家现代农业产业技术体系广西南美白对虾产业创新团队项目(nyCytXGXCXtd-03-14); 广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻14121006-2-2)
【所属期刊栏目】西南农业学报
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