达氏鲟精巢细胞消化分离和超低温冷冻保存
2016-05-05分类号：S917.4
【部门】西南大学生命科学学院 农业部淡水生物多样性保护重点实验室中国水产科学研究院长江水产研究所 中国科学院水生生物研究所
【摘要】通过研究两种酶对精巢细胞的消化效果，探究抗冻剂、降温程序、糖类和卵磷脂对达氏鲟（Ａｃｉｐｅｎｓｅｒ ｄＡｂｒｙＡｎｕｓ）精巢细胞冻存效果的影响，获得消化冻存后高存活率的细胞。实验使用０．２５％胰蛋白酶和２ ｍｇ／ｍ Ｌ胶原酶Ｈ＋５００ ｕ／ｍ Ｌ中性酶ｉｉ的组合酶对达氏鲟精巢细胞进行消化，获得不同消化时间内的活细胞数量。另外，还研究了冷冻稀释液中分别添加１０％二甲基亚砜（ｄｍｓＯ）、乙二醇（ｅｇ）、甲醇（ｍｅＴ）作为抗冻剂，采用－１℃／ｍｉｎ慢速降温以及直接投入液氮中的快速降温方法冻存，冷冻稀释液采用ｄ－海藻糖或同浓度ｄ－蔗糖，以及添加５％、８％、１１％卵磷脂对冻存效果的影响。结果显示：两种消．．．
【关键词】达氏鲟(Acipenser dabryanus) 胰蛋白酶 冷冻保存 抗冻剂 卵磷脂
【基金】中央级公益性科研院所基本科研业务费(2015B02YQ01); 公益性行业(农业)科研专项(201203086); 国家自然基金青年项目(31402301)
【所属期刊栏目】淡水渔业
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