猪TGEV HN-2012株ORF3a和ORF3b基因遗传变异分析及其真核表达研究
2016-03-14分类号：S852.65
【部门】河南农业大学牧医工程学院 河南省动物性食品安全重点实验室
【摘要】【目的】研究猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）ＨＮ－２０１２株ＯＲＦ３ａ和ＯＲＦ３ｂ基因的遗传变异情况。【方法】根据ＧＥＮｂａＮｋ公布的猪传染性胃肠炎病毒ＯＲＦ３ａ和ＯＲＦ３ｂ基因序列，分别设计合成１对特异性引物，通过ＲＴＰＣＲ从猪传染性胃肠炎病毒ＨＮ－２０１２株的ＣＤＮａ中扩增ＯＲＦ３ａ和ＯＲＦ３ｂ基因，经克隆测序后，将其基因序列与ＮＣｂＩ中不同来源的ＴＧＥＶ毒株的相应序列进行同源性分析，构建系统进化树并进行遗传变异分析，然后将ＯＲＦ３ａ和ＯＲＦ３ｂ基因亚克隆至真核表达载体，构建ＰＣａＧＧＳ－ＯＲＦ３ａ－ＦｌａＧ和ＰＣａＧＧＳ－ＯＲＦ３ｂ－ＦｌａＧ载体，转染２９３Ｔ细胞进行表达，利用ＦｌａＧ标签．．．
【关键词】TGEV河南分离株(HN-2012) ORF3a和ORF3b基因 293T细胞 真核表达
【基金】国家自然科学基金项目“Ⅰ型干扰素在TGEV与树突状细胞相互作用中的免疫功能及调控机制研究”(31101796); 河南省基础与前沿技术研究计划项目“猪传染性胃肠炎病毒感染对ST细胞免疫生物学特性的影响”(112300410161)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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