【摘要】以干酪乳杆菌为传递载体，以开发食品级安全的减蛋综合征病毒疫苗为目标，构建了一个温度敏感型自杀型质粒系统ｐ ＯＲＺｐ－ＵＫＤ。将该质粒电转化到干酪乳杆菌Ｌ．ｃａｓｅｉ中，经过２次升温处理和５－氟尿嘧啶抗性筛选，挑选阳性克隆，采用ｐｃＲ和ｓＤｓ－ｐａＧｅ方法进行鉴定。ＫｎＯｂｓ基因整合到干酪乳酸杆菌基因组内，并实现融合蛋白ＫｎＯｂｓ的分泌表达。表明得到了一株具有无任何选择性标记、携带有ＫｎＯｂｓ表达盒元件的基因组整合的重组干酪乳酸杆菌ＫｎＯｂｓΔＵｐｐ Ｌ．ｃａｓｅｉ，且整合的外源基因能够随着细菌的复制而进行表达，为减蛋综合征病毒免疫保护性抗原ＫｎＯｂｓ疫苗的进一步研制提供了试验数据。