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斜带石斑鱼肝细胞分离及原代培养方法的建立

2016-04-15分类号:S917.4

【作者】骆源  张春晓  王玲  张冬玲  霍振华  宋凯  
【部门】集美大学水产学院厦门市饲料检测与安全评价重点实验室  
【摘要】本研究以斜带石斑鱼肝细胞为实验对象,在不同培养条件下进行原代培养,旨在探讨稳定可靠的斜带石斑鱼肝细胞分离及原代培养方法。采用组织块分离法和胰蛋白酶(含EDTA)消化法分离肝细胞,并通过密度梯度离心法分离纯化肝细胞,细胞悬液于DMEM/F-12、M199和L-15培养液中培养;细胞活力及数量采用血球计数板计数,并通过MTT法测定细胞增殖率;同时,测定不同时间培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、白蛋白(ALB)和尿素氮(BUN)的含量,以分析肝细胞生长状态。结果表明,组织块方法不适于斜带石斑鱼肝细胞的培养,未见细胞从组织块中迁出,而胰蛋白酶消化法获得良好稳定的培养效果,细胞产量达到1.6×108...
【关键词】斜带石斑鱼  肝细胞  原代培养  细胞增殖率  肝细胞功能
【基金】国家自然科学基金(31302198)~~
【所属期刊栏目】水产学报
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