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家蚕GATA转录因子BmGATA6的克隆、多克隆抗体制备及组织细胞定位

2016-01-26分类号:S881.2

【作者】谭鹏  徐曼  梁航华  张亚军  胡仁建  崔红娟  
【部门】西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室  
【摘要】【目的】克隆家蚕(BomByx mori)GATA转录因子BmGATA6,将其在原核细胞中进行表达,纯化重组蛋白,多次免疫小鼠获得BmGATA6多克隆抗体,为进一步分析BmGATA6在家蚕变态发育中的功能提供抗体条件。【方法】解剖家蚕获得5龄第3天的各组织及4眠至熟蚕整个时期的中肠组织,在液氮中研磨为粉末,利用Trizol法提取rNA,体外反转录得到c DNA。基于家蚕BmGATA6的基因编码序列设计全长特异引物,并以Bm AcTiN3作为内参,进行家蚕5龄第3天各组织及4龄眠期至熟蚕期各时期的rT-Pcr检测。设计原核表达引物,扩增原核表达片段连接到P ET32A载体上,构建原核表达载体,转...
【关键词】家蚕  BmGATA6  原核表达  多克隆抗体  亚细胞定位
【基金】国家自然科学青年基金(81201551); 中央高校基本科研业务费专项资金(XDJK2013B020,SWU111014); 高等学校博士学科点专项科研基金(20130182110003); 重庆市科委自然科学院士基金(CSTC2013JCyJyS0007)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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