布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应分子BPE123和BPE275基因的原核表达与鉴定
2016-04-07分类号：S852.61
【部门】石河子大学动物科技学院动物疾病防控兵团重点实验室
【摘要】【目的】克隆布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应分子ＢＰＥ１２３和ＢＰＥ２７５的基因并进行诱导表达。【方法】从牛种布鲁氏菌２３０８株基因组中ＰＣＲ扩增ＢＰＥ１２３和ＢＰＥ２７５基因片段，亚克隆到ＰＧＥＭ－Ｔ Ｅａｓｙ载体中并测序。将ＢＰＥ１２３和ＢＰＥ２７５基因克隆至融合表达载体ＰＥＴ－２８ａ，构建表达重组质粒ＰＥＴ－２８ａ－ＢＰＥ１２３和ＰＥＴ－２８ａＢＰＥ２７５，在大肠杆菌中进行诱导表达，ＷＥｓＴＥＲｎ ＢｌｏＴ分析重组蛋白Ｈｉｓ－ＢＰＥ１２３和Ｈｉｓ－ＢＰＥ２７５的免疫学特性。【结果】ＰＣＲ扩增获得了４６２ＢＰ的ＢＰＥ１２３基因片段和７６２ＢＰ的ＢＰＥ２７５基因片段，成功构建了ＰＥＴ－２８ａ－ＢＰＥ．．．
【关键词】布鲁氏菌 Ⅳ型分泌系统 效应蛋白
【基金】国家自然科学基金项目(31360610); 新疆生产建设兵团国际合作项目(2013BC005); 石河子大学杰出青年项目(2012ZRKXJQ02)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
文献传递
