草鱼呼肠孤病毒GCRV VP56相互作用蛋白的鉴定
2016-03-15分类号：S943
【部门】上海海洋大学水产与生命学院国家水生动物病原库 上海海洋大学水产与生命学院农业部淡水种质资源重点实验室 淡水水产健康养殖湖北省协同创新中心
【摘要】为研究Ⅱ型草鱼呼肠孤病毒外纤维蛋白ＶＰ５６与宿主蛋白的相互作用，实验采用酵母双杂交Ｇａｌ４系统鉴定与ＶＰ５６相互作用的草鱼蛋白。首先利用ＲＴ－ＰＣＲ技术从Ⅱ型ＧＣＲＶ感染的草鱼肾细胞中扩增目的基因ＶＰ５６，构建Ｐ ＧＢＫＴ７－ＶＰ５６诱饵表达载体；在酵母菌株中检测其自激活性后，以ＶＰ５６为诱饵在草鱼酵母双杂交文库中筛选阳性菌株，并对阳性克隆的序列进行分析。实验也克隆了草鱼ＪａＭ－ａ（ＧＣ ＪａＭ－ａ）基因，并构建Ｐ ＧａＤＴ７－ＧＣ ＪａＭ－ａ载体，在酵母中研究草鱼ＧＣ ＪａＭ－ａ与病毒蛋白ＶＰ５６相互作用的可能性。研究表明构建的诱饵质粒Ｐ ＧＢＫＴ７－ＶＰ５６无自激活作用，可以应用于酵母双杂．．．
【关键词】草鱼 呼肠孤病毒 VP56蛋白 酵母双杂交 Gc JAM-A蛋白
【基金】国家自然科学基金(31372561); 现代农业产业技术体系建设专项(CARS-46-12); 上海海洋大学研究生教育创新计划~~
【所属期刊栏目】水产学报
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