太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)类α-1;2-岩藻糖基转移酶的密码子优化与原核表达
2016-01-27分类号：S917.4
【部门】农业部水产品质量安全检测与评价重点实验室农业部水产品质量安全风险评估实验室(青岛)中国水产科学研究院黄海水产研究所 潍坊市产品质量检验所
【摘要】牡蛎消化组织内存在的类Ａ型血型组织抗原是其特异性富集诺如病毒的主要原因，ＦＵＴ２（ＦＵｃｏｓｙｌＴｒＡｎｓＦｅｒＡｓｅ ２，α－１，２－岩藻糖基转移酶）是Ａ型血型组织抗原合成的关键酶。本研究在前期克隆了太平洋牡蛎（ｃｒＡｓｓｏｓＴｒｅＡ ｇｉｇＡｓ）类ＦＵＴ２基因ｃＤｎＡ全长的基础上，根据大肠杆菌密码子偏爱性优化并合成了类ＦＵＴ２基因，插入原核表达载体ｐｒｓｅＴ Ａ构建ｐｒｓｅＴ－ｍｏＦ，将其转化大肠杆菌Ｂｌ２１，用异丙基－β－Ｄ－硫代半乳糖苷（ｉｐＴｇ）诱导。经ｓＤｓ－ｐＡｇｅ分析显示，在３７℃、ｉｐＴｇ终浓度为０．８ ｍｍｏｌ／ｌ的条件下，诱导４ ｈ后出现大小约为４６ ｋ ＤＡ的特异性目的．．．
【关键词】太平洋牡蛎 类FUT2基因 密码子优化 原核表达
【基金】国家自然科学基金(31101883); 科技部科技基础性工作专项(2013FY113300)共同资助
【所属期刊栏目】渔业科学进展
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