半滑舌鳎黑色素聚集激素重组制备与生物活性分析
2016-10-15分类号:S917.4
【部门】中国水产科学研究院黄海水产研究所 上海海洋大学水产与生命学院
【摘要】根据半滑舌鳎黑色素聚集激素(MCH1)的C DNA序列设计特异性引物扩增成熟肽片段,利用原核表达载体p ET-32A成功构建了重组MCH1/p ET32A质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)后经IpTG诱导可产生N端含6个组氨酸的重组蛋白。半滑舌鳎MCH1重组蛋白大小为29.9 ku,32°C条件下以0.2 MMoL/L IpTG诱导6 H时目的蛋白表达量最高,占菌体总蛋白的49.8%。WEsTErN BLoTTING免疫印迹表明,MCH1重组蛋白可被6×HIs抗体特异性识别。经NI2+-NTA亲和柱纯化,可获得高纯度的MCH1重组蛋白。采用垂体离体孵育方法测试蛋白活性,MCH1重组蛋白可有效...
【关键词】半滑舌鳎 黑色素聚集激素 原核表达 生物活性
【基金】国家鲆鲽类产业技术体系项目(CARS-50)~~
【所属期刊栏目】水产学报
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