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重组铜绿假单胞菌外毒素A的原核表达和多克隆抗体制备及免疫保护功能分析

2016-02-25分类号:S852.4

【作者】刘祥  
【部门】陕西理工学院生物科学与工程学院  
【摘要】为探索铜绿假单胞菌ETA蛋白的免疫保护功能,采用分子克隆方法获得铜绿假单胞菌ETA表达菌株;利用切胶纯化获得ETA蛋白并免疫小鼠,制备ETA蛋白多克隆抗体;用ELISA方法,检测出ETA抗血清滴度达1∶8 000;蛋白质印迹分析结果表明,抗血清具有很好的特异性;小鼠免疫保护试验结果表明,ETA对铜绿假单胞菌感染的保护率达50%,显著高于对照组的免疫保护率。用DNAmAN软件对ETA序列同源性进行分析,发现革兰氏阴性菌的同源性高于革兰氏阳性菌,铜绿假单胞菌种间的同源性高于其他种类细菌的同源性;用mEGA软件对ETA的进化分析结果表明,不同血清型铜绿假单胞菌的亲缘关系高于其他细菌,据此可推测ETA...
【关键词】铜绿假单胞菌  外毒素A  原核表达  多克隆抗体  酶联免疫法  免疫保护
【基金】国家大学生创新创业训练计划项目(201510720556); 陕西省大学生创新创业训练计划项目(1949); 陕西理工学院大学生创新创业训练计划项目(UIRP15006)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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