整合子相关元件多重PCR检测技术建立及其在弧菌中应用
2016-11-15分类号：R378
【部门】中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业资源及生态重点开放实验室 上海海洋大学水产与生命学院
【摘要】为了建立一种能同时检测１类整合子、４类超级整合子和１型插入序列共同区的多重ＰＣＲ检测方法，根据Ｇｅｎ Ｂａｎｋ中１类整合子整合酶基因ｉｎｔ１、４类超级整合子整合酶基因ｉｎｔＳＸｔ和１型插入序列共同区转座酶基因ｉＳＣＲ１的序列，应用ＰＲｉｍｅＲ ＰｌｅＸ ２．６１设计３对特异性引物，通过改变引物浓度和退火温度对多重ＰＣＲ体系进行了优化。此后，评价了所建立多重ＰＣＲ体系的特异性和灵敏度，并应用于２２２株海水养殖源弧菌中３种整合子相关元件的检测。结果显示，设计的３对引物能分别单独且特异性地扩增出５６９ ＢＰ、４３０ ＢＰ和６５１ ＢＰ的目的条带；当ｉｎｔ１、ｉｎｔＳＸｔ和ｉＳＣＲ１３对引物（１０ Ｐ．．．
【关键词】多重PCR 整合子 SXT ISCR1 弧菌
【基金】上海市科技兴农重点攻关项目(沪农科攻字〔2014〕第3-4号); 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(东海水产研究所L-2015-1602)
【所属期刊栏目】上海海洋大学学报
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