副猪嗜血杆菌病原夹心ELISA检测方法的建立及应用
2016-12-28分类号：S858.28
【部门】广东省农业科学院动物卫生研究所广东省畜禽疫病防治研究重点实验室广东省兽医公共卫生实验室粤北生猪生产及疫病防控协同创新发展中心 仲恺农业工程学院动物科学系
【摘要】为了建立一种准确、快速的副猪嗜血杆菌病原夹心ＥＬＩＳＡ检测方法，以副猪嗜血杆菌外膜蛋白Ｐ５的特异性单克隆抗体１Ｅ２作为捕获抗体，兔抗副猪嗜血杆菌多克隆抗体作为检测抗体，通过方阵滴定优化夹心ＥＬＩＳＡ检测方法最佳反应条件，并对该检测方法进行特异性、敏感性验证以及临床样品的检测应用。结果显示，该检测方法中单克隆抗体１Ｅ２最佳包被浓度为３．４３４μｇ／ｍ Ｌ，兔抗副猪嗜血杆菌多抗的最佳稀释浓度为３．３５０μｇ／ｍ Ｌ，用１０ ｍｇ／ｍ Ｌ明胶３７℃封闭１ ｈ优于其他封闭液，辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔多体最佳使用浓度为１∶４ ０００。该检测方法的特异性试验结果显示可检测出１５个血清型的副猪嗜血杆菌病．．．
【关键词】副猪嗜血杆菌 单克隆抗体 夹心ELISA
【基金】广东省公益研究与能力建设专项资金(2014B070706011;2015B070701015); 广东省农业领域科技计划项目(2013B020307002); 广州市新型畜禽疫病诊断试剂研发及产业化(201508020055); 广州市重大民生专项(201300000066); 国家“十二五”科技支撑计划项目(2015BAD12B02-4)
【所属期刊栏目】华北农学报
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