旱稻孢囊线虫ISSR反应体系的建立与优化
2016-06-25分类号:S435.116
【部门】湖南农业大学植物保护学院 植物病虫害生物学与防控湖南省重点实验室 中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室
【摘要】采用正交设计对旱稻孢囊线虫ISSR–PCR反应体系的4因素(Taq酶、模板DNa、D NTPS、引物)在4个用量水平上进行优化试验。结果表明,旱稻孢囊线虫ISSR–PCR最佳的反应体系为:在25μL反应体系中,含Taq DNa聚合酶(5 U/μL)0.3μL﹑模板DNa 1μL﹑D NTPS(2.5 mmoL/L)2μL﹑引物(10μmoL/L)1μL﹑10×PCR BUffeR(20 mmoL/L mg2+PLUS)2.5μL。引物UBC887最适退火温度为48℃。优化的旱稻孢囊线虫ISSR–PCR的反应体系和程序有较好的重复性和稳定性。
【关键词】旱稻孢囊线虫 ISSR–PCR 反应体系 反应优化
【基金】
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
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