肉色吸水链霉菌SH121接合转移系统的建立
2016-06-28分类号:S476.1
【部门】华中农业大学农业微生物学国家重点实验室
【摘要】利用单因素试验探索了热激处理、预萌发时间、供体宿主菌的类型、供受比及MgCl_2浓度对链霉菌SH121接合转移效率的影响,结果显示:在50℃热激10Min,37℃预萌发1H,以大肠杆菌DCDA/pUZ8002为供体宿主菌,在供受比为100∶1时,使用添加40MMol/l MgCl_2的培养基M-iSp4,接合转移效率最高可达到每受体1.03×10~(-3)个接合子。利用建立好的接合转移方法,将整合型质粒pSET152和基因敲除质粒pYZ09成功地导入链霉菌SH121,证实该方法可用于后期链霉菌SH121活性天然产物的挖掘及其相关生物合成基因簇的研究工作。
【关键词】肉色吸水链霉菌SH-121 接合转移 遗传操作 基因敲除
【基金】国家自然科学基金项目(30970059,31270136); 教育部留学回国人员科研启动基金项目(2009-1590);教育部新世纪人才支持计划项目(NCET-08-0779)
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
文献传递