烟草靶斑病菌(Rhizoctonia solani)issR反应体系的优化及遗传多样性分析
2016-02-15分类号：S435.72
【部门】沈阳农业大学植物保护学院 沈阳市疾病预防控制中心 内蒙古民族大学农学院 黑龙江省烟草公司牡丹江烟草科学研究所
【摘要】以烟草靶斑病菌（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｉ）基因组Ｄｎａ为模板，采用单因素和正交设计ｌ＿（１６）（４～５）相结合的方法对影响ｉｓｓＲ－ＰｃＲ反应的主要因子进行优化，并对采自东北三省烟区的２０个烟草靶斑病菌菌株进行ｉｓｓＲ分析，建立了适宜于病菌的ｉｓｓＲ分子标记的最佳反应体系，即２０μｌ的反应体系中含有模板Ｄｎａ ３０ｎｇ，Ｍｇ～（２＋）浓度２．０ＭＭｏｌ·ｌ～（－１），Ｄ ｎｔＰ浓度０．２０ ＭＭｏｌ·ｌ～（－１），ｔａｑ酶１．０Ｕ，引物浓度０．４μＭｏｌ·ｌ～（－１）。利用优化的反应体系从２０个ｉｓｓＲ引物中筛选出１３个多态性和重复性好的引物，对２０个烟草靶斑病菌菌株进行ｉｓｓＲ分．．．
【关键词】烟草靶斑病 立枯丝核菌 ISSR反应体系 遗传相似系数 聚类分析
【基金】国家烟草专卖局科技项目[国烟办综(2010)182号]; 辽宁省烟草专卖局科技攻关项目[辽烟计(2010)86号]; 黑龙江省烟草专卖局科技攻关项目(HN201301号)
【所属期刊栏目】沈阳农业大学学报
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