梨小食心虫普通气味结合蛋白2(GmolGoBP2)cDNA的克隆与原核表达
2016-05-03分类号：S433.4
【部门】西北农林科技大学植物保护学院植保资源与病虫害治理教育部重点实验室应用昆虫学重点实验室 长江大学农学院昆虫研究所湿地生态与农业利用教育部工程研究中心
【摘要】【目的】克隆梨小食心虫（Ｇｒａｐｈｏｌｉｔａ ｍｏｌｅｓｔａ）普通气味结合蛋白２（ＧｍｏｌＧｏＢｐ２）的全长ｃＤＮａ序列并进行原核表达，为研究该蛋白在梨小食心虫化学感受系统中的作用奠定基础。【方法】利用ｒｔ－ｐｃｒ和ｒａｃｅ技术克隆ＧｍｏｌＧｏＢｐ２的全长ｃＤＮａ序列，并使用原核表达载体ｐｅｔ－３２ａ在大肠杆菌Ｂｌ２１（Ｄｅ３）中进行表达，用ｓＤｓｐａＧｅ和ＷｅｓｔｅｒＮ Ｂｌｏｔ检测其表达情况。【结果】ＧｍｏｌＧｏＢｐ２的ｃＤＮａ全长序列为６３７Ｂｐ（ＧｅＮＢａＮｋ登录号：ＪＮ８５７９４０），开放性阅读框长度为４８３Ｂｐ，编码１６１个氨基酸残基，成熟蛋白分子质量为１５．９８ｋｕ，等电点为４．．．．
【关键词】梨小食心虫 普通气味结合蛋白2 分子克隆 原核表达
【基金】国家自然科学基金项目(31501641,31272043); 农业部公益性行业(农业)科研专项(201103024)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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