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小鼠FABP4基因启动子驱动红色荧光蛋白载体的构建及在牛体细胞中的表达

2016-12-28分类号:Q78

【作者】岳永莉  于海泉  
【部门】内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室  
【摘要】小鼠脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)的启动子/增强子元件是脂肪组织特异性启动元件,为了鉴定该元件在牛体细胞中的启动效果,首先以小鼠肝脏DNA为模板,通过PCR克隆得到5.9 kB的FABP4基因启动子片段,连入P MD19-T载体后进行酶切及测序鉴定,经ECo T 22I酶切去除非核心启动子区后精简为2.3 kB的片段,通过SACⅡ酶切将5.9 kB片段和2.3 kB片段的启动子连入红色荧光蛋白载体P DS-RED 2-1的多克隆位点,构建为表达质粒P MF5.9-RED和P MF2.3-RED,利用脂质体法将上述载体分别转染牛脂肪间充质干细胞及牛胎儿成纤维细胞,24 h后实时定量PCR检测...
【关键词】小鼠FABP4启动子  载体构建  牛体细胞
【基金】转基因生物新品种培育科技重大专项(2014ZX08010005)
【所属期刊栏目】华北农学报
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