甘蔗条纹花叶病毒HC-Pro、P3N-PIPo、CP和VPg基因酵母双杂交诱饵表达载体的构建及自激活检测
2016-02-28分类号：S435.661
【部门】农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室福建农林大学
【摘要】为探索甘蔗条纹花叶病毒与甘蔗的互作机制，利用酵母双杂交技术筛选与ＳＣＳＭＶ互作的甘蔗因子基因，利用ＰＣＲ技术克隆了ＳＣＳＭＶ的ＨＣ－ＰＲｏ、Ｐ３Ｎ－ＰＩＰｏ、ＣＰ和ＶＰｇ的编码区，构建到酵母双杂交诱饵载体Ｐ ｇＢＫＴ７上，获得了Ｐ ｇＢＫＴ７－ＨＣ－ＰＲｏ、Ｐ ｇＢＫＴ７－Ｐ３Ｎ－ＰＩＰｏ、Ｐ ｇＢＫＴ７－ＣＰ和Ｐ ｇＢＫＴ７－ＶＰｇ ４个诱饵载体。结果显示，将重组质粒转化酵母Ｙ２Ｈｇｏｌｄ酵母菌株后，酵母菌株在Ｓｄ／－ＴＲＰ平板上生长良好，表明重组诱饵质粒表达产物对酵母细胞无毒性；在Ｓｄ／－ＴＲＰ／Ｘ－α－ｇａｌ平板上长出白色菌落未变蓝，在Ｓｄ／－ｌｅｕ、Ｓｄ／－ＴＲＰ／－ａｄｅ、Ｓｄ／－Ｔ．．．
【关键词】甘蔗条纹花叶病毒 HC-Pro P3N-PIPO CP VPg 诱饵载体 酵母双杂交
【基金】国家高技术研究发展计划“863计划”项目(2013AA102604); 国家自然科学基金项目(31171605;31371688)
【所属期刊栏目】华北农学报
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