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拟南芥叶绿体发育必需蛋白PAC的原核表达及多克隆抗体制备

2016-09-07分类号:Q946

【作者】王玥  梁爽  梁慧珂  郁飞  齐亚飞  
【部门】西北农林科技大学生命科学学院/旱区作物逆境生物学国家重点实验室  
【摘要】【目的】将拟南芥叶绿体发育必需蛋白PAC进行大肠杆菌原核表达和纯化,并免疫家兔,获得针对PAC蛋白的多克隆特异性抗体,为进一步研究PAC蛋白在叶绿体发育中的功能提供保证。【方法】将编码拟南芥PAC蛋白的CDNA克隆至原核表达载体PET-28A中,转化BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导后,对诱导产生的PAC蛋白进行镍柱亲和纯化和SDS-PAGE割胶纯化,并将纯化的PAC蛋白通过皮下注射免疫家兔,利用分离得到的抗血清,针对拟南芥野生型、PAC敲除突变系PAC-1和PAC过表达系PACOE的总蛋白进行免疫印迹检测。【结果】成功构建了拟南芥基因PAC的原核表达载体PET-28A-PAC,在37℃...
【关键词】叶绿体  PAC蛋白  原核表达  抗体制备
【基金】国家自然科学基金项目(31300988); 教育部博士点基金新教师项目(20120204120036); 国家级大学生创新训练计划项目(20140712071)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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