【摘要】运用ＰＣＲ定点突变技术对载体Ｐ ＢｌｕｅｓＣＲｉＰｔⅡｓＫ（＋）以及植物表达载体Ｐ ＣＡＭＢⅠＡ１３００多克隆位点内相关的酶切位点进行改造，为运用ＣＲｉｓＰＲ／ＣＡｓ９基因编辑载体在构建敲除体系时提供更多便捷可用的酶切位点。通过酶切鉴定以及测序表明，成功将Ｐ ＢｌｕｅｓＣＲｉＰｔⅡｓＫ（＋）载体多克隆位点内ＸｈｏⅠ、ｅＣｏＲⅤ、ｓＭＡⅠ、ｓＡＣⅡ４个酶切位点，分别改造为ＮｈｅⅠ、ＭｆｅⅠ、ＮｓｉⅠ、ＰＡＣⅠ；将Ｐ ＣＡＭＢⅠＡ１３００植物表达载体多克隆位点内的ｓＡＣⅠ、ｓＡｌⅠ以２个酶切位点分别改造为ＮｓｉⅠ、ＰＡＣⅠ，为今后构建ＣＲｉｓＰＲ／ＣＡｓ９基因组编辑载体及对植物功能基因进行精准定位．．．