大花蕙兰转齿兰环斑病毒外壳蛋白基因及检测
2016-04-15分类号:S436.8
【部门】中国林业科学研究院林业研究所林木遗传育种国家重点实验室 邯郸市环境监测中心站 北京农学院农业应用新技术北京市重点实验室
【摘要】[目的]通过植物转基因技术获得抗病毒大花蕙兰种质资源,优化转化体系和鉴定方法。[方法]本研究克隆了齿兰环斑病毒外壳蛋白基因,并构建了该基因的p BI121表达载体,用根癌农杆菌介导法转化大花蕙兰,尝试以巢式pCR方法检测转基因再生植株。[结果]优化了大花蕙兰遗传转化体系,建立了利用巢式pCR技术检测转基因大花蕙兰植株的方法,获得了32株转基因株(系)。[结论]优化了以类原球茎为外植体的农杆菌介导转化大花蕙兰的方法,确定以5%10%类原球茎存活时的抗生素(卡那霉素)浓度为筛选浓度;获得了转ORSV Cp基因大花蕙兰植株;对大花蕙兰转基因植株检测时,巢式pCR较普通pCR更灵敏、准确。
【关键词】大花蕙兰 齿兰环斑病毒 外壳蛋白基因 转基因 巢式PCR
【基金】中国特色花卉种业关键技术研究(2012BAD01B07)
【所属期刊栏目】林业科学研究
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