【摘要】［目的］ＲＮＡ解螺旋酶Ａ（ＲＮＡ ｈｅｌｉｃＡｓｅ Ａ，ＲｈＡ）参与许多细胞生物学过程中，并能促进爱滋病病毒１型（ｈｉＶ－１）等一些病毒的复制，本试验旨在探究温度、ｐ ｈ值对ＲｈＡ的动力学影响。［方法］利用ｐｃＲ扩增全长ＲｈＡ基因，构建重组载体ｐ ｅＴ－２８Ａ－ＲｈＡ和ｐ ｃｏｌｄ－Ⅰ－ＲｈＡ，分别转化至Ｂｌ２１ ｓＴＡＲ（ｄｅ３）和Ｂｌ２１、ＲｏｓｅＴＴＡ２菌株中，加ｉｐＴＧ分别在２８℃和１５℃中诱导表达。将全长ＲｈＡ基因重组到ｐ ＦＡｓＴ ＢＡｃ ｄｕＡｌ载体中，然后将重组穿梭载体转化到含有杆状病毒基因组的ｄｈ１０ＢＡｃ感受态细胞中，通过转座作用，将ＲｈＡ基因整合到杆状病毒基因组中。提取重．．．