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柑橘衰退病毒基因p23 RNAi载体的构建及转化

2016-10-21分类号:S436.66

【作者】李芳  邓子牛  赵亚  李大志  戴素明  
【部门】湖南农业大学园艺园林学院/国家柑橘改良中心长沙分中心  
【摘要】【目的】构建柑橘衰退病毒(Citrus tristeza virus,Ctv)含p23的rNai载体,以获得具有抗性的柑橘转基因植株。【方法】基于转化病毒基因介导抗性,根据NCBi公布的Ctv基因组序列,查找p23保守序列,设计并克隆两条不同长度的片段。对两条片段和植物表达载体p Bi 121进行双酶切和连接来构建rNai载体。初步预测所构建的载体发生rNai抗病毒的可行性。利用农杆菌介导的瞬时表达技术将含rNai载体的农杆菌注射入Ctv指示植物墨西哥莱蒙的叶片,利用Gus组织化学染色法观察叶片中载体发生瞬时表达的情况。发生瞬时表达的叶片接种Ctv t36基因型,利用酶联免疫反应(eLisa)...
【关键词】柑橘衰退病毒  p23  RNAi  大红甜橙  瞬时表达  遗传转化
【基金】国家自然科学基金(30900972,3157211); 国家公益性行业(农业)科研专项(201203076-06); 湖南省研究生科研创新项目(CX2013B290)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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