标题
  • 标题
  • 作者
  • 关键词

小麦Ta-SKP2a克隆及其酵母双杂交诱饵载体的构建

2016-04-28分类号:S435.121.43

【作者】许媛  李铃仙  魏春茹  魏新燕  于秀梅  刘大群  
【部门】河北农业大学生命科学学院  河北省植物生理与分子病理学重点实验室  河北农业大学国家北方山区农业工程技术研究中心  河北省农作物病虫害生物防治工程技术研究中心  
【摘要】SKP2A是调控细胞周期转录因子降解的F-box蛋白。为研究该蛋白在小麦-叶锈菌互作过程的作用,首先克隆获得中国春小麦TA-SKP2A全长序列,然后将其与PGbKT7载体连接,转入酵母Y187感受态细胞中,构建酵母诱饵表达载体,并检测其表达产物对酵母细胞有无毒性和自激活效应。结果表明,TA-SKP2A编码区序列长度为1 146 bP,其oRF区编码一条由382个氨基酸组成的多肽。在oRF区两侧连接酶切位点(EcoRⅠ和bAm HⅠ),并将其与载体PGbKT7连接,成功构建了包含目的基因的诱饵载体PGbKT7-TA-SKP2A,且含重组诱饵质粒的酵母菌株在SD/-TRP营养缺陷平板上生长良好,其...
【关键词】小麦  F-box基因SKP2A  诱饵载体构建  毒性检测  自激活效应
【基金】国家自然科学基金项目(31301649); 高等学校博士学科点专项科研基金项目(20121302120010)
【所属期刊栏目】华北农学报
文献传递