【摘要】［目的］本研究以水稻‘日本晴’为遗传转化受体材料，利用ＲＮＡｉ技术对水稻气孔调控型钾吸收通道ＯｓＫＡＴ３进行功能研究。［方法］通过将ＯｓＫＡＴ３与拟南芥和水稻中的ＫＡＴ类钾通道进行同源性比对，找到编码此蛋白基因Ｃ端的一段特异区域，并用于ＯｓＫＡＴ３ ＲＮＡｉ表达载体的构建。设计含有相应酶切位点的引物扩增该特异片段，以ＯｓＫＡＴ３作为模板进行ＲＮＡｉ－ＯｓＫＡＴ３顺式和反式目的片段的ＰＣＲ扩增。经菌落ＰＣＲ鉴定挑选阳性克隆后送测序，测序结果表明：ＲＮＡｉ－ＯｓＫＡＴ３顺式和反式目的片段均已正确连接到Ｐ ＭＤ１９－Ｔ载体上，分别利用ｓＡＣⅠ／ｓＰｅⅠ和ＢＡＭ ＨⅠ／ＫＰＮⅠ酶切ＲＮＡｉ－ＯｓＫＡＴ．．．