【摘要】为获得抗病毒的转基因植物新材料，采用同源重组法构建了抗苹果茎痘病毒的植物表达载体，并对苹果砧木材料Ｍ２６进行了遗传转化，成功获得了转基因阳性植株。首先以感病的皇家嘎拉叶片为材料，反转录合成ｃ ＤＮＡ第一链，采用ＰｃＲ方法克隆获得了４８９ ｂＰ的ＡＳＰＶ外壳蛋白基因的保守片段，通过ＴＯＰＯ克隆技术将该基因片段连接进入载体Ｐ ＥＮＴＲ／ＳＤ／Ｄ，构建了入门克隆载体Ｐ ＥＮ－ＡＳＰＶ，再通过ＬＲ反应置换该片段连接进入目标载体Ｐ ＨＥＬＬＳｇＡＴＥ１２，构建了ＲＮＡｉ植物表达载体ＰＨＥ－ＡＳＰＶ，并采用冻融法转入根癌农杆菌菌株ＥＨＡ１０５中，获得了可用于植物遗传转化的工程菌ＥＨ－ＡＳＰＶ。采用农杆菌介．．．