蓖麻标雌/单雌/两性系花序MSAP反应体系的建立
2016-06-28分类号：S565.6
【部门】内蒙古民族大学生命科学学院 通辽市农业科学研究院 内蒙古高校蓖麻产业工程技术研究中心 内蒙古蓖麻育种重点实验室 通辽市农畜产品质量安全中心
【摘要】为了建立Ｌｍ型雌性系蓖麻不同发育时期的标雌／单雌／两性系花序ｍＳＡＰ反应体系，提取不同类型不同发育时期的花序基因组ＤＮＡ，混合成基因池；用ＥｃｏＲⅠ和ＨＰＡⅡ／ｍＳＰⅠ的组合，１２ Ｈ可将ＤＮＡ酶切完全；１６℃条件下，将酶切产物与ＥｃｏＲⅠ、ＨＰＡⅡ／ｍＳＰⅠ接头过夜连接；连接产物用于预扩增。优化后的预扩增反应体系为１０×ＰｃＲ ＢｕｆｆＥＲ ２．５μＬ、Ｄ ＮＴＰＳ（１０ ｍｍｏＬ／Ｌ）２．５μＬ、ｍｇ２＋（２５ ｍｍｏＬ／Ｌ）２．０μＬ、模板２．０μＬ、Ｅ０扩增引物（１０ＰｍｏＬ／μＬ）１．５μＬ、Ｈ０扩增引物（１０ ＰｍｏＬ／μＬ）１．５μＬ、ＬＡ ＴＡｑ（５ ｕ／μＬ）０．２５μＬ、Ｄ．．．
【关键词】蓖麻 花序 MSAP
【基金】国家自然科学基金项目(30760123;31160290;31460353); 国家农业部公益性行业专项(201003057); 内蒙古自治区高等学校“青年科技英才支持计划”(NJYT-14-A10); 内蒙古自治区科技创新引导项目; 内蒙古自治区“草原英才”计划项目; 市校合作项目(SXZD2012018;SXZD2012017;SXZD2012006); 内蒙古自治区高校蓖麻产业工程技术研究中心开放基金项目(BMYJ2011009)
【所属期刊栏目】华北农学报
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