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玉米蛋白质组研究中双向电泳技术条件的优化

2016-08-28分类号:S513

【作者】董婧  逯晓萍  吕二锁  薛春雷  李俊伟  
【部门】内蒙古农业大学农学院  内蒙古农牧业科学院  
【摘要】为了优化玉米叶片双向凝胶电泳技术条件,通过比较3种总蛋白提取方法对玉米双向电泳结果的影响,并对蛋白质上样量、IEF等电聚焦条件及SDS-聚丙烯酰胺凝胶浓度等参数进行探索、优化;结果发现,与酚提取法和磷酸缓冲液法相比,采用改进的TCA/丙酮法提取总蛋白操作简单、方便,所得的2-DE图谱中蛋白质点数量多、背景清晰,是一种适用于提取玉米苗期叶片总蛋白的有效方法;同时筛选出:第一向IEF等电聚焦样品上样量为800μg,聚焦条件为20 000 V/h,在浓度为12.5%的SDS-聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳,能够在17 Cm的IPg胶条上获得背景低、分辨率较高、重复性好的双向电泳图谱,该优化体系适用于玉米叶...
【关键词】玉米  叶片  蛋白质提取  双向电泳
【基金】内蒙古自治区科学技术项目(20131410); 内蒙古呼和浩特科学技术项目(2013-重-计-1)
【所属期刊栏目】华北农学报
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