牛MYOZ1基因启动子活性分析
2016-08-09分类号：S823
【部门】西北农林科技大学动物科技学院 国家肉牛改良中心
【摘要】【目的】鉴定牛ＭＹＯＺ１基因转录起始位点，确定牛ＭＹＯＺ１基因核心启动子区域，为进一步研究牛ＭＹＯＺ１基因的转录调控机制奠定基础。【方法】以秦川牛肌肉５′ＲＡＣＥ准备ＣＤＮＡ为模板，设计５′ＲＡＣＥ扩增试验，确定牛ＭＹＯＺ１基因转录起始位点。以秦川牛外周血基因组ＤＮＡ为模板，通过ＰＣＲ克隆获得牛ＭＹＯＺ１基因转录调控区－１ ６２８／＋６１目的片段。通过生物信息学分析软件预测可能包含的转录因子结合位点，设计逐段缺失引物，获得７个亚克隆，将其分别与ＰＧＬ３－ＢＡｓｉＣ载体连接，得到牛ＭＹＯＺ１基因启动子双荧光素酶报告基因重组质粒，通过脂质体法转染Ｃ２Ｃ１２细胞系，检测７个重组质粒的荧光素酶活性，分．．．
【关键词】牛 MYOZ1 5′RACE 启动子 双荧光素酶报告载体
【基金】“十二五”国家“863”计划项目(2013AA102505,2011AA100307-02); 国家现代农业产业技术体系建设专项(CARS-38); “十二五”国家科技支撑计划项目(2011BAD28B04-03)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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