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甘蓝型油菜PEPC基因ihPRNA表达载体的构建与遗传转化研究

2016-12-28分类号:S565.4

【作者】邢蔓  谭太龙  李健  邬贤梦  官春云  熊兴华  
【部门】湖南农业大学作物基因工程湖南省重点实验室  国家油料改良中心湖南分中心  
【摘要】为提高油菜含油量,构建了基于油菜磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(PEPC)的ihPRNA植物表达载体。分别从甘蓝型油菜基因组中克隆了种子储藏蛋白NAPiN基因启动子(315 bP)、PEPC基因的外显子片段(246 bP)及PEPC基因的内含子(754 bP),包含了其剪切位点之前4 bP和之后18 bP片段。通过中间载体PbluEsCRiPtⅡsK(+)再构建到Pbi121中,构成种子特异表达的内含子剪接的PEPC基因的RNA干扰载体P bi121.NP+iP-。利用农杆菌介导法对湘油15号进行遗传转化,获得卡那霉素抗性转化植株9株,PCR检测证实外源片段成功导入其中7株油菜基因组中。对t2种子...
【关键词】甘蓝型油菜  PEPC基因  ihpRNA载体  转基因油菜  含油量
【基金】国家“973”计划项目(2015CB150200); 湖南省科技计划项目(2014FJ1006-3)
【所属期刊栏目】华北农学报
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