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毛果杨中链酰基辅酶A合成酶的克隆及酶学分析

2016-07-15分类号:S792.11

【作者】曹山  蒋璐瑶  李丽红  要笑云  张强  撖静宜  王莹  李慧  陆海  
【部门】北京林业大学生物科学与技术学院  
【摘要】中链酰基辅酶A合成酶(MACS)属于腺苷酸合成酶超基因家族,催化中链脂肪酸与辅酶A结合形成相应的中链酰基辅酶A。本研究通过同源检索毛果杨基因组数据库中的4CL基因,克隆得到毛果杨Pt MACS1的基因序列(基因编号:eSt ext_fgeneSh4_Pg.C_640066)。通过序列分析可知,Box I和Box II两个在4CL中保守的结构域在该蛋白中并不保守。将Pt MACS1与原核表达载体P et-30A(+)构建融合表达载体Pt MACS1-P et-30A(+),转化大肠杆菌BL21(De3)后诱导重组蛋白进行表达。镍柱纯化重组蛋白后进行酶学活性分析,研究结果表明该蛋白对中链脂肪酸己酸...
【关键词】毛果杨  MACS  克隆  原核表达  酶学分析
【基金】国家自然科学基金项目(31570582,30671697,J1103516)
【所属期刊栏目】北京林业大学学报
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