黄瓜T-DNA插入突变体库的构建
2016-01-30分类号:S642.2
【部门】南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/园艺学院
【摘要】[目的]为了进一步研究黄瓜基因的功能,本文构建了黄瓜T-DNA插入突变体库。[方法]以黄瓜栽培品种‘长春密刺’子叶节为转化外植体,通过农杆菌介导的遗传转化方法,将T-DNA插入突变载体pROK2后转化黄瓜;通过筛选压力梯度试验,确定遗传转化体系最适合的卡那霉素(KAN)筛选浓度;使用pCR检测和斑点杂交方法鉴定T0和T1代转化植株;以‘长春密刺’植株为对照,统计T1代植株表型。[结果]确定100 mg·L-1为最适合的KAN抗性芽筛选浓度。T0代植株pCR检测结果初步证明,pROK2成功整合到14S1和14S2两个T0代株系基因组中。14S1自交后获得55个T1代单株,对其进行pCR检测,发现...
【关键词】黄瓜 T-DNA 插入突变 转基因 pROK2载体
【基金】国家自然科学基金重点项目(31430075); 国家重点基础研究发展计划项目(2012CB113904); 国家863计划项目(2012AA100202); 国家公益性行业(农业)科研专项(201403032); 国家自然基金青年基金项目(31301781)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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