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棉花精氨琥珀酸合成酶基因GhASS1的克隆及表达分析

2016-03-31分类号:S562;Q943.2

【作者】王慧飞  孙艳香  冯雪  张一名  杨江涛  马梅芳  陈光  
【部门】廊坊师范学院生命科学学院遗传与育种研究所  吉林农业大学生命科学学院  
【摘要】【目的】克隆棉花精氨琥珀酸合成酶基因Gh ASS1的c DNA序列,并利用原核表达系统高效表达融合蛋白,检测融合蛋白的精氨琥珀酸合成酶活性及其表达对工程菌生长、耐盐能力及与游离L-瓜氨酸(L-cit)和L-精氨酸(L-ArG)含量的影响,为解析该基因的功能及作用机制奠定基础。【方法】以拟南芥推断的精氨琥珀酸合成酶c DNA序列作为探针,利用电子克隆和rt-Pcr技术,从棉花幼叶中获得c DNA片段,t/A克隆测序后得其序列信息,利用生物信息学软件分析其DNA结构、蛋白质结构、功能域和同源性,并构建系统进化树。利用q rt-Pcr检测其在盐胁迫下的表达模式;将Gh ASS1的开放阅读框连接到原核...
【关键词】棉花  精氨琥珀酸合成酶基因  耐盐胁迫  real-time PCR
【基金】河北省自然科学基金(C2010001804); 河北省遗传学重点发展学科(201221)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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