新疆多浪羊IL-1β基因原核表达载体的构建与表达
2016-08-09分类号：S826
【部门】塔里木大学生命科学学院 塔里木大学动物科学学院 新疆兵团塔里木畜牧科技重点实验室
【摘要】【目的】构建新疆多浪羊ＩＬ－１β基因编码区的原核表达载体，在大肠杆菌中进行诱导表达，为进一步研究ＩＬ－１β蛋白的结构功能奠定基础。【方法】从含质粒ｐＭＤ－１８Ｔ－ＩＬ－１β的大肠杆菌ＤＨ５α中获取ＩＬ－１β基因，与ｐＥＴ－２８ｂ质粒ＤＮＡ连接，构建原核表达载体ｐＥＴ－２８ｂ－ＩＬ－１β。先将其转化到克隆载体Ｅ．ｃｏＬＩ ＤＨ５α感受态细胞中大量拷贝，经菌液ｐｃＲ和ＥｃｏＲⅠ、ＸＨｏⅠ双酶切鉴定后，提取ｐＥＴ－２８ｂ－ＩＬ－１β质粒转化到表达载体Ｅ．ｃｏＬＩ ｂＬ２１（ＤＥ３）中，再次进行菌液ｐｃＲ和ＥｃｏＲⅠ、ＸＨｏⅠ双酶切鉴定。将阳性单克隆接种于Ｌｂ液体培养基，以终浓度为１ＭＭｏＬ／Ｌ Ｉｐ．．．
【关键词】多浪羊 IL-1β基因 原核表达
【基金】国家自然科学基金项目“棉酚对新疆多浪羊白细胞介素表达的影响研究”(30960277); 创新群体项目“南疆地区羊标准化养殖的群发病防控及预警响应机制研究”(TDZKCX201401)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
文献传递
