利用E.coli表达猪圆环病毒2型cap蛋白生产病毒样颗粒疫苗
2015-03-02分类号:S859.79
【部门】国家兽用生物制品工程技术研究中心 扬州大学兽医学院
【摘要】【目的】研究利用大肠杆菌可溶性表达PCV2b亚型ORF2基因,利用重组CaP蛋白制备PCV2 VLP疫苗的可行性。【方法】根据大肠杆菌密码子使用频率表优化合成PCV2 NJ株ORF2基因,将其插入原核表达载体P QZ1,鉴定阳性后转入表达宿主菌bL21,利用原核表达平台CVC1102对重组菌进行诱导表达。利用SDS-PaGE与WEStERN bLOttiNG对目的基因的表达及产物的可溶性进行分析;利用电镜分析技术鉴定重组CaP蛋白VLP组装;利用bCa试剂盒测定重组大肠杆菌破碎后上清中总蛋白量,利用薄层扫描分析确定目的蛋白百分比,得出目的蛋白量,将重组CaP蛋白的浓度调整为1 mG·m L-1...
【关键词】猪圆环病毒2型 ORF2基因 可溶性表达 病毒样颗粒 免疫原性
【基金】国家公益性行业(农业)科研专项(201303046); 江苏省农业自主创新专项(CX(13)3074)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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