【摘要】［目的］为了寻找可用于研制高效重组疫苗的抗原基因，利用ｇａｔｅｗａｙ技术构建巨型艾美耳球虫孢子化卵囊ｃＤＮａ表达文库。［方法］首先从新鲜分离的巨型艾美耳球虫孢子化卵囊中提取总ＲＮａ并分离纯化ｍＲＮａ，用ｃｌｏＮｅ ｍｉＮｅＲｔｍⅡｃＤＮａ文库构建试剂盒构建巨型艾美耳球虫孢子化卵囊ｃＤＮａ初级文库，然后将ｃＤＮａ从初级文库重组到ｐ ＶａＸ１．０上，构建巨型艾美耳球虫孢子化卵囊ｃＤＮａ表达文库，最后用７个已知巨型艾美耳球虫基因的引物鉴定文库。［结果］构建的巨型艾美耳球虫孢子化卵囊ｃＤＮａ初级文库总容量为０．９２×１０７ｃＦＵ，插入片段平均大小为１．６３ ｋｂ；表达文库总容量为２．３２×１０７ｃＦＵ．．．